Kit di purificazione o estrazione di acidi nucleici
Nucleicu Acid Extrazione Or Purificazione Kito conservatu à -20 ℃. U campione deve esse trasportatu cù curling 0 ℃.
Introduction
L'estrazione di l'acidu nucleicu o u kit di purificazione (Metudu Magnetic Beads) hè pensatu per a purificazione automatizata di RNA è DNA da fluidi di u corpu (cum'è tamponi, plasma, serum) utilizendu strumenti d'estrazione di l'acidu nucleicu automatizatu. A tecnulugia di particelle magnetiche furnisce DNA / RNA di alta qualità chì hè adattatu per l'usu direttu in applicazioni downstream cum'è l'amplificazione o altre reazioni enzimatici.
Application Range
U sangue sanu, plasma, serum è altri campioni di tissuti sò stati direttamente lisi è digeriti. L'acidu nucleicu liberatu hè statu adsorbitu selettivamente da perle magnetiche nanometri superparamagnetiche. Allora a proteina, l'ioni di u salinu inorganicu è l'impurità urgànichi sò stati eliminati da a suluzione di lavare. Infine, l'acidu nucleicu hè eluutu cù l'eluente per ottene una solu suluzione di l'acidu nucleicu.
Kit Contents
Cat. No. | YXN-VIRAL01-32A-BR | Cumpunenti | ||
-50A | - 100 A | |||
Taglia | 32 tes | 50 Test | 100 Test | |
Tampone di lisi | 96 bè Pre-pack ed Piatti 2 pezzi | 25 ml | 50 ml | Surfactant è Tris |
Tampon de lavage I | ★ 15 ml | ★ 30 ml | Solu solu saline | |
Tampon Lavaggio Il | ★ 6 ml * 2 | ★ 12 ml * 2 | Soluzione pocu sali | |
Tampon d'eluzione | 10 ml | 20 ml | Soluzione pocu sali | |
Reagent MagaBio | 1,0 ml | 2,0 ml | Particelle magnetiche | |
Manuale (=YXN-VIRAL01-32A-BR) | 1 | 1 | 1 | |
Notes:PerYXN-VIRAL01-32A-BR-50A,aghjunghje 15mL Etanolu assolutu à ★15mL Wash Buffer I prima di usu; aghjunghje 24mL Etanol assolutu à ★6mL Lavare buffer Il prima di usu. | ||||
PerYXN-VIRAL01-32A-BR-100A, aghjunghje 30mL Etanol assolutu à ★30mL Wash Buffer I prima di usu; aghjunghje 48mL Etanolu assolutu à ★ 12mL Lavare buffer Il prima di l'usu.【Reagenti da esse preparatu da l'utilizatori】Per piacè preparate l'etanol assolutu (gradu analiticu) da sè stessu. |
Storage Conditons
À l'arrivu di u kit, i cumpunenti di u kit pò esse guardatu à a temperatura di l'ambienti (15 - 25 ° C). I reagenti sò stabile finu à un annu da a data di fabricazione.
Sample Requirements
1. Campione applicabile: Tamponi, plasma, serum è sangue sanu ecc.
2. L'almacenamiento è u trasportu di mostra: A mostra deve esse pruvata immediatamente
Materials è Devices Required but Not Provided
1. Guanti dispunibuli senza polvere
2. Container Biohazard
3. Matita o per
Procedure
U seguitu usa una lozione di tampone di estrazione di striscia di campionu cum'è un esempiu per spiegà brevemente i passi di l'operazione di u reattivu di estrazione nantu à l'instrumentu di estrazione di l'acidu nucleicu biologicu.Bioer NPA-32 poSMART 32. Per altri tipi di mostra, fate riferimentu à u manuale d'utilizatore. Pò esse ancu operatu da i clienti secondu l'acquistu sperimentale:
1. Reagente Preparazione
a. PerYXN-VB03-32A-50A è YXN-VB03-32A-100A
Add 500uL Lysis Buffer à a colonna 1 è 7 di a piastra 2.2mL 96-deep-well, 500uL Wash Buffer I à a colonna 2 è 8, 500uL Wash Buffer II à a colonna 3, 4 è 9,10; 70uL Tampon d'Eluzione à a colonna 5 è 11, 180uL d'acqua pura è 20uL MagaBio Reagent à a colonna 6 è 12 (i perle magnetichi deve esse mischiate bè prima di l'usu),
b. PerYXN-VB03-32A
Mettite i 96 reagenti ben pre-imballate à a temperatura di l'ambienti. Scuzzulate a piastra da 96 pozzi à l'inversu per trè volte, è strappate u saccu di plastica. Centrifugare u reattivu pre-imballatu per uni pochi seconde (o swing a manu uni pochi di volte) per evità u reattivu aderisce à u muru di i tubi. Strappate u filmu d'aluminiu di a piastra di 96 pozzi è identificà a direzzione di a piastra (perle magnetiche in a colonna #6 è #12),
2.Campione Estrazione
1. Aghjunghjite 300uL di campionu à e colonne di piastra di 96 pozzi #1 è #7, per piacè evità a contaminazione incruciata,
2. Pone 96 piastra di pozzu prufonda à l'instrumentu, installate i punte 8-strip in u strumentu,
3. Run u prugrammu secondu à i seguenti prucedure,
4. Dopu chì a purificazione automatica hè finita, trasfirìu u Buffer d'eluzione in e culonne 5 è 11 à un tubu centrifuge antinuclear 0.5mL pulito; s'ellu ùn l'utilizanu micca immediatamente, per piacè guardate à -20 ° C.
Performance Characteristics
1. U pruduttu estratto hè rilevatu da u reattivu di deteczione di DNA HBV d'alta sensibilità per ghjunghje à una sensibilità di 10 IU / mL. U pruduttu estratto hè rilevatu da un reattivu di rilevazione HCV RNA d'alta sensibilità per ghjunghje à una sensibilità di 50 IU/mL.
2. Selezziunate 4 campioni (serum / plasma sample, nasofaringeal swab sample, cervical exfoliated cell sample), ogni campionu hè diluitu 10 volte cù 3 gradienti (cumpresu u totale di mostra originale di 4 concentrazioni), utilizendu reagenti qualificati è agenti di teste per detectà internu. gene di riferimentu secondu l'istruzzioni di u produttu, è u valore Ct di ogni batch differe di menu di 1.
Step | Ebbè Locu | Programma Nome | Waitng Time(min:SS) | Mixing Time(min:SS) | Magnet Time(min:SS) | Adsorbimentu | Spiscia | Volume statu (μl) | Ttemperatura |
1 | 1 | Lysoru | 0:00 | 2: 00 | 0:00 | F | 700 | 80 | |
2 | 6 | Beads | 0:00 | 0:15 | 0:15 | √ | F | 200 | |
3 | 1 | Bind | 0:00 | 3:00 | 0:45 | √ | F | 700 | |
4 | 2 | Wfrassini 1 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
5 | 3 | Wfrassini 2 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
6 | 4 | Wfrassini 3 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
7 | 5 | Eluzione | 2: 00 | 2:30 | 0:30 | F | 70 | 80 | |
8 | 6 | Scartà | 0:00 | 0:15 | 0:00 | F | 200 |
Safety
1. GENERUAL SICUREZZA.
L'usu di stu pruduttu in una manera chì ùn hè micca specificata in a documentazione di l'utilizatori pò causà ferite persone o danni à l'instrumentu o u dispusitivu. Assicuratevi chì qualcunu chì usa stu pruduttu hà ricevutu struzzioni in pratiche di sicurezza generale per i laboratorii è l'infurmazioni di sicurezza furnite in stu documentu.
1.1 Prima di utilizà un strumentu o un dispositivu, leghjite è capiscenu l'infurmazioni di sicurezza furnite in a documentazione d'utilizatore furnita da u fabricatore di l'instrumentu o dispusitivu.
1.2 Prima di manipulà i sustanzi chimichi, leghjite è capisce tutte e Schede di Dati di Sicurezza (SDS) applicabili è utilizate l'equipaggiu di prutezzione persunale adattatu (guanti, vestiti, prutezzione di l'ochji, etc.). Per uttene SDS, vede a sezione "Documentazione è Supportu" in stu documentu.
2. Chimica sicurità
MANIPULAZIONE CHIMICA GENERALE. Per minimizzà i periculi, assicuratevi chì u persunale di u laboratoriu leghje è mette in pratica e linee guida di sicurezza generale per l'usu chimicu, u almacenamentu è i rifiuti furnite quì sottu, è cunsultate a SDS pertinenti per precauzioni è struzzioni specifiche: Leghjite è capisce e Schede di Dati di Sicurezza (SDS) furnite da a chimica. fabricatore prima di almacenà, manighjà o travaglià cù qualsiasi sustanzi chimichi o materiali periculosi.
2.1 Minimize u cuntattu cù i sustanzi chimichi. Purtate l'equipaggiu di prutezzione persunale adattatu quandu manipule sustanzi chimichi (per esempiu, occhiali di sicurezza, guanti o vestiti protettivi).
2.2 Minimize l'inalazione di sustanzi chimichi. Ùn lasciate micca i cuntenituri chimichi aperti. Aduprate solu cù una ventilazione adatta (per esempiu, cappa di fume).
2.3 Verificate regularmente per fughe chimiche o spills. Se si verifica una fuga o spill, seguitate e prucedure di pulizia di u fabricatore cum'è cunsigliatu in a SDS.
2.4 Manipulate i rifiuti chimichi in una cappa di fume.
2.5 Assicurà l'usu di cuntenituri di rifiuti primari è secundarii. (Un rifiutu primariu
u containeru cuntene i rifiuti immediati. Un cuntainer secundariu cuntene spills o fuite da u cuntainer primariu. I dui cuntenituri devenu esse cumpatibili cù u materiale di rifiutu è risponde à i requisiti federali, statali è lucali per u almacenamentu di u containeru.).
2.6 Dopu avè svuotatu un containeru di rifiuti, sigillallu cù u tappu furnitu.
2.7 Caratterizà (per analisi se ne necessariu) i rifiuti generati da l'applicazioni particulari, i reagenti è i sustrati utilizati in u vostru laboratoriu.
2.8 Assicurà chì i rifiuti sò almacenati, trasferiti, trasportati è sguassati in cunfurmità cù tutti i regulamenti lucali, statali / provinciali è / o naziunali.
2.9 I materiali radioattivi o biopericulati ponu esse bisognu di manipolazione speciale, è ponu applicà limitazioni di dispusizione.
3.Biologicu periculu sicurità
Biohazard potenziale. Sicondu i campioni utilizati in stu strumentu, a superficia pò esse cunsiderata un biohazard. Aduprate metudi di decontaminazione adattati quandu u travagliu cù i biohazards.
BIORISCHIU. I campioni biologichi cum'è tissuti, fluidi di u corpu, agenti infizziosi è sangue di l'omu è di l'altri animali anu u putenziale di trasmette malatie infettive. Segui tutte e regulazioni lucali, statali / provinciali è / o naziunali applicabili. Purtate l'equipaggiu protettivu adattatu, chì include ma ùn hè micca limitatu à: occhiali protettivi, scudo facciale, vestiti / mantellu di laboratoriu, è guanti. Tuttu u travagliu deve esse realizatu in strutture attrezzate bè cù l'equipaggiu di sicurezza adattatu (per esempiu, i dispositi di cuntinimentu fisicu). L'individui duveranu esse furmatu in cunfurmità cù i requisiti regulatori è di a cumpagnia / istituzione applicabili prima di travaglià cù materiali potenzialmente infettivi.
Leghjite è seguite e linee guida applicabili è / o requisiti regulatori in i seguenti:
In i Stati Uniti: u Dipartimentu di a Salute è i servizii umani di i Stati Uniti publicati in Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories truvati à: www.cdc.gov/biosafety.
Norme di Sicurezza è Salute Occupational, Patogeni di Sangue (29 CFR§1910.1030), truvata à:
www.access.gpo.gov/nara/cfr/waisidx_01/29cfr1910a_01.html
I protokolli di u prugramma di biosicurezza di a vostra cumpagnia / istituzione per travaglià cù / manighjà materiali potenzialmente infettive. L'infurmazioni supplementari nantu à e linee di periculu biologicu sò dispunibili à: www.cdc.gov.
In l'UE: Verificate e linee guida è a legislazione lucali nantu à i biorisichi è a precauzione di biosicurezza è riferite à e migliori pratiche publicate in u Manuale di Biosicurezza di Laboratori di l'Organizazione Mondiale di a Salute (OMS), terza edizione, truvata à: www.who.int/csr/resources/publications /biosafety/WHO_CDS_CSR_LYO_200 4_11/fr/.